三糖鐵瓊脂培養基TSI檢測原理結果操作方法技術應用問題

㈠三糖鐵瓊脂培養基檢驗檢測基本原理

三糖鐵瓊脂培養基（TSI）用來技術鑒定腸道細菌進行發酵蔗糖/乳糖/葡萄糖并形成硫化氫的生化反應。蛋白胨和牛肉浸出粉提供了氮源/維生素和礦物質；乳糖/葡萄糖和蔗糖是可進行發酵的糖。當它們形成產出酸時，用酚紅指示劑測定方法，酸度為黃色，而堿度為紅色。硫代硫酸鈉能夠被某些細菌轉變成硫化氫，與硫酸亞鐵中的鐵鹽形成黑色硫化鐵。保持氯化鈉的穩定平衡滲透壓；它是瓊脂培養基的凝固劑。

⑴TSI三糖鐵瓊脂培養基試管的三糖為葡萄糖/乳糖/蔗糖，葡萄糖的含量僅為乳糖或蔗糖的十分之一。當細菌病毒分解掉糖原類時，產酸會減少酸堿值，斜面和底層會有些發黃:

①要是細菌病毒只分解掉葡萄糖而不分解掉乳糖和蔗糖，中海生物考慮到葡萄糖的含量低，形成的少量酸與空氣接觸到會被氧化，在細菌病毒生長發育繁衍操作過程中會借助含氮物質轉化成堿性化合物實現中和，使斜面重新變紅；考慮到底層仍處于缺氧狀態，細菌病毒分解掉葡萄糖形成的酸暫時性不被氧化，始終保持黃色。

②要是細菌病毒能分解掉葡萄糖、乳糖和蔗糖，形成大量的酸，則斜面和底層為黃色。

③要是細菌病毒沒辦法進行發酵糖，斜面和底層也不會變色，反倒是會變紅。

⑵細菌病毒分解掉葡萄糖、乳糖或蔗糖，一起形成酸和氣體，試管便會產生故障問題。

⑶細菌病毒形成的硫化氫會與培養基中的硫酸亞鐵產生反應，形成黑色硫化鐵，生成黑色范圍。

㈡TSI培養基檢驗結果顯示判定

中海三糖鐵瓊脂培養基TSI檢驗結果有以下四種顯示狀態:

⑴斜面紅色/底層紅色：葡萄糖/乳糖和蔗糖沒辦法進行發酵，它是非發酵菌的基本特征（銅綠假單胞菌）。

⑵斜面紅色/底層黃色：進行發酵葡萄糖而不是乳糖/蔗糖是非進行發酵乳糖細菌病毒的基本特征（志賀氏菌）。

⑶斜面紅色/底層黃色，部分范圍黑色：葡萄糖進行發酵但乳糖和蔗糖不進行發酵，一起形成硫化氫，它是形成硫化氫和無乳糖細菌病毒的基本特征（沙門氏菌\亞利桑那菌\檸檬酸桿菌\變形桿菌）

⑷斜面黃色/底層黃色：進行發酵葡萄糖、乳糖和蔗糖是乳糖進行發酵大腸菌群的基本特征(大腸桿菌、克雷伯氏菌和腸桿菌)

㈢三糖鐵瓊脂培養基使用操作方法

稱量本產品六十四點五克，進行加熱溶化于一千毫升蒸餾水中，燒開一分鐘左右，裝進十六毫米乘一百五十毫米的試管中，在一百二十一攝氏度高壓滅菌消毒十五分鐘左右，制造而成高層斜面。

㈣TSI培養基技術應用

重點做為雞白痢沙門氏菌的分離鑒定及滅活疫苗研發。為預防雞白痢沙門氏菌病，中海生物從疫源地分離鑒定的雞白痢沙門氏菌強毒株被研發成油乳劑滅活疫苗和蜂膠滅活疫苗。

㈤三糖鐵瓊脂培養基需注意的問題

查驗形成硫化氫的異常細菌病毒時，應立即觀測檢驗結果顯示，避免轉化成的硫化鐵形成黑色范圍，蓋坡和底層的顏色會直接影響對檢驗結果顯示的判定。

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